當科學家玩轉生命密碼:轉基因生物究竟有多神奇?


摘要

當科學家開始像編輯文件般改寫DNA密碼,轉基因生物早已從科幻走進現實。這篇想聊聊那些藏在實驗室裡的基因魔術——有些方法老派但可靠,有些新潮卻帶刺 歸納要點:

  • 重組DNA技術其實就像拼樂高,把基因剪剪貼貼放進載體,但細節操作起來總有些小眉角——像我有次看實驗室學姊搞了整週才搞定質體轉染
  • 逆轉錄病毒載體雖然穩定,但插入位置像抽盲盒,記得有篇論文統計過...嗯大概四成案例會卡到重要基因?這風險得自己掂量
  • CRISPR號稱基因剪刀界的瑞士刀,不過實際用起來偶爾會手滑切錯地方,去年隔壁團隊還為這吵了好幾輪數據
從質體微注射到CRISPR,每種改寫生命的工具都藏著自己的脾氣。

如果說到基因轉殖動物,好像不少人腦中會冒出那種加了外來基因、在某些場合下變得不太一樣的動物。這類技術,從七十多年前開始慢慢有人琢磨,聽說早期也沒幾個能成功。不過後來進展比較快,有些學者回想起八零年代那陣子,感覺好像才剛剛有人試著把新基因放進去小鼠之類的小動物裡。當然啦,也有一些經典案例,比如那隻叫OncoMouse的老鼠,就曾經被拿來當專利申請,不知道大家是不是都還記得。

這段歷史其實有點像是一連串嘗試和修正,有時候是農業用、有時候又跑到醫學研究領域去了。動物身上可以做的事越來越多,有的人會提到抗病能力提升,也有人關心產量是否因此略增。有趣的是,相關應用至今仍舊不斷演化,每隔幾年就出現新的話題或討論焦點。

基本上,只要談起基因改造動物,很多人都認為這門科技對生物學帶來了一些新的可能,但成效如何,大概還得看具體情況吧。

原文參考: https://www.imagingcoe.org/tw/column/878/genetically-modified-animals-future

動物的基因工程這個領域裡頭,大家有時會先談到一些像是重組DNA的技術。這種做法大致就是把想要的基因弄出來、複製一點,再用載體轉進動物細胞。其實說起來,這些步驟好像蠻常見,但每次操作細節可能都不太一樣。偶爾聽說有人直接把某些DNA打進受精卵的前核,這種微注射方式在小鼠身上看過很多案例。不過,也不是什麼新鮮事了。

另外還有用逆轉錄病毒當工具,把特定基因送進去宿主的染色體內,好處是表現比較穩定,但也有那麼點風險,有時候插入的位置剛好影響到其他基因,那就麻煩了。有位學者提過,大約將近一半的情況下,插入的位置很難預測。

最近幾年CRISPR-Cas9倒是變得大家都在討論,它能做得更精準,有人說比傳統方式省不少功夫。但講到底,每次修改成功率也不是一定,有時還會遇到意外的小錯誤,所以還在持續改良中。

其實方法那麼多,每種技術各自有優缺點,適合什麼場合,用哪一套,也沒誰能給個絕對答案。有些技術據說效率提升了數十倍,可真正應用起來,也要看動物品系和具體條件。科學界不少研究團隊一直在調整和嘗試,看看到底哪些路線比較容易走通吧。

科學家如何改造動物基因?四種關鍵技術大解密

大致上,做出轉基因動物這事,好像得先搞清楚要的那個基因是哪一種。有時候大家是為了某些抗病能力啦,或是讓成長速度變快之類的。找到以後嘛,就會把這段基因剪下來,然後再放進一個算是運送用的小載體裡面。聽說載體有各式各樣,反正就是方便後續操作。

說到怎麼把這些外來基因弄進去,其實方法還不少。常見的,有一種是直接拿顯微針,把基因注射到剛受精不久的卵細胞裡,那蛋細胞好像比頭髮還細很多。當然,也有人偏好用胚胎幹細胞,就是先改造那些幹細胞,再把它們塞回早期胚胎裡。不過哪一招比較適合,倒也看情況。有時候還有人嘗試讓精子帶著外來DNA去受精,好像成功率不一定很高。另外有聽過用病毒(好像多半是逆轉錄病毒)來當搬運工,把想要的基因嵌入動物染色體裡,不過安全性什麼的,有些人會考慮。

等到這些步驟都完成,大概就輪到確認成果了吧?通常會檢查那隻小動物身上到底有沒有真的帶上新加進去的那段DNA,好像最常見的方法有PCR、Southern blot之類。有時候,光檢查DNA還不夠,得看看蛋白質有沒有表現出來,比如會用qPCR或Western blot。不過每個研究室喜歡的方法可能略有不同。

如果確定那些特徵都在,小動物們通常會被留下繼續繁殖下去。大家似乎習慣先跟原生種配對幾代,看那個新特徵能不能穩定傳給下一批。不過要養出穩定品系,好像也需要花上一陣子,不是一兩代就搞定。

最後,大致上還得觀察一下這群轉基因動物到底和普通同伴差在哪裡。有的人重視外觀、生長速度;也有人關心行為變化,有時甚至分子層次都要驗證一下。如果效果明顯,大概就能初步判斷那段引入的新基因發揮作用了。不過整個流程其實蠻複雜,而且偶爾還會遇到預料之外的小插曲…

說到轉基因動物,這領域其實有點廣,應用場景也不只一兩種。有人會先想到醫學研究,好像科學家們有時候就讓老鼠或者其他小動物帶著人的疾病基因跑來跑去,用來模擬某些病,比如癌症啊、腦部退化問題什麼的。據說這樣能幫助理解疾病過程,有些新藥也是靠這類動物先做初步測試,但成效大概還是要看情境。

農業那邊,印象中也有相關新聞提過。好像有牛奶產量比以前多出將近一半的乳牛,還有豬仔被弄得比較不容易生病。至於雞蛋裡加了什麼營養素,那個講法眾說紛紜,大致上是想讓雞蛋變得更健康,不過到底能不能真的吃出差別,也沒有定論。

製藥倒是聽過一些奇特案例。有一批羊或山羊之類的,被改造過後,他們產出的奶裡頭竟然可以抽出某些重要蛋白質。這些東西在治療血液凝固問題的人身上好像挺受用,但市面上流通情況如何就沒那麼明確。

還有人提到保育,其實最近這塊慢慢冒出聲音。有團體想透過基因工程來救瀕危物種——當然成效如何還是未知數。甚至有人談論利用這方法讓族群裡本來快消失的遺傳型態重新回來,只是技術層面和道德討論都挺複雜。

如果再往工業方面扯一點,也許會碰到像仿蜘蛛絲那樣的材料。部分人認為轉基因動物可以生產難以人工合成的特殊纖維,聽起來很新鮮,但規模跟用途目前頂多在少數應用看到。另外偶爾也有人嘗試把牠們拿來監測環境,不過具體效果怎麼樣,好像暫時沒有太多人關注。

總而言之,這東西發展了一段時間,各行各業都有些嘗試,有進展但也不少疑問,目前還很難直接下結論說哪一塊一定有效或適合每個場合吧。

顯微注射技術如何將外源DNA送入受精卵?

說到基因改造動物,這些年來出現過幾種被討論得挺多的例子。有一隻老鼠,好像叫做OncoMouse吧,當初設計它就是為了癌症研究。後來,聽說牠還拿到了專利,不少實驗室都用它來觀察腫瘤生長。然後那些會發光的小魚——GloFish,有時候在水族館裡能看到。最早聽說牠們是給環境監控用的,但現在看起來更多人只是把牠們當作寵物,也有點像是科學和生活混在一起的感覺。

另外,Enviropig這種豬,據說可以讓排泄物裡面的磷含量變得低很多,大概比傳統豬少了好幾倍吧。這樣一來,如果農場養的是這類豬,對附近河流或土壤的污染可能會減輕一些。不過,實際上普及沒那麼快,好像一直在試驗階段。

還有些比較特別的例子,比如某些山羊經過改造之後,牠們的奶裡面能找到人類抗凝血蛋白。這部分技術偶爾會被提到製藥產業,但具體應用範圍現在看起來還沒非常廣泛。有關雞隻,有團隊努力讓雞對禽流感產生抵抗力。如果真能大規模落實,也許未來養雞場遇到疫情時衝擊就不會那麼大。

其實每個案例背後都有不少細節與討論空間,有時候連具體數字都很難釐清,只能估算個大概。所以即使科技往前走,不同領域的人看法也常常不太一樣。


在這個領域裡,有些人會提到「轉基因動物」這個詞,意思大概就是指那些基因組被加入外來DNA的生物。其實這一類技術差不多從上世紀八○年代開始就陸續冒出頭,距今也有幾十年了吧。那時候有個叫OncoMouse的小鼠,曾經還被拿去申請專利——雖然不是所有人都記得它的名字,但在相關研究圈子裡,好像還蠻常被舉例當作早期代表。

說到怎麼讓基因換新裝,其實目前坊間流傳的方式不少,例如重組DNA技術啦,就是先找出想要的那段基因,把它複製起來,再用載體把它帶進動物身上;具體步驟其實挺繁瑣,也有人覺得聽起來像拼積木。不過說得簡單一點,就是把某種性狀「搬家」過去。

有些時候,也會看到科學家直接把DNA打進受精卵的細胞核裡,好像是叫顯微注射?這種做法比較常見於老鼠那類小型哺乳動物吧,不過實際操作感覺需要不少手藝和運氣。有趣的是,有時候也會借用病毒(主要是逆轉錄病毒)來幫忙送遞基因,雖然這樣能讓目標基因比較穩定地留在下一代身上,可偶爾也會擔心萬一插錯地方是不是會出現什麼不可預料的小插曲。

整體來看,這些方法各有適合的場合和限制,沒什麼一定最好的選項。至於成效如何、對醫學或農業能產生多大影響,大概只能說根據不同情境,有時候能達到預期目的,有時則還需要其他配套措施或等待更多資料累積才能下結論。

轉基因小鼠為何成為醫學研究的超級助手?

CRISPR-Cas9這個基因編輯的技術,最近幾年好像在遺傳學領域有點被談論得多,據說它讓科學家可以比較精確地動手調整基因,但效果怎麼樣還是看情境。以前要修改某些特定基因,大家的方法各有不同,有人會先去找到那段想要的DNA,再把它抽出來——不過這步驟細節每次聽都感覺有點複雜,也不是所有場合都一樣。大致上是挑選出帶有預期性狀,比如抗病力或成長速度比較快的那種基因,再設法用一些載體把它包裝起來,好像準備寄信一樣。

至於怎麼把這些新的DNA送進動物體內,每個實驗室偏好的方式差異蠻大的。有時候常見的是顯微注射,就是直接拿針戳進剛受精沒多久的卵裡,把那段想要的基因塞進去。還有人用胚胎幹細胞來操作,他們會先讓細胞吸收外來DNA,再將處理過的細胞放回發育中的胚胎裡頭,最後可能生出所謂嵌合體的小動物。不過這方法聽說也不是每次都順利。

另外,有種做法是透過處理過的精子,把新DNA帶進去,好像比其他方法簡單一點,可實際應用時結果總是不太穩定。還有靠逆轉錄病毒當作載體,用病毒本身插入能力,把新基因帶到宿主染色體上,這樣有機會能讓改造後的特徵比較穩定表現,但安全性和效率其實大家討論蠻久了。

其實不管哪種技術,從開始找目標基因、到最後真的看到改變,都花掉不少時間。有些環節容易失敗,有時候甚至得反覆嘗試好多次才會成功——很多研究人員也只能說目前看到部分案例有效果,不代表所有情況下都一樣順利啦。

進行基因轉殖後,總是得想辦法確認那段外來的基因到底有沒有真的跑到動物的基因裡。有些實驗室好像會用PCR,有些還是偏好傳統一點的Southern blot,反正就是要檢查一下。至於表現量,就有人會再拿qPCR測,甚至有時候還看一下蛋白質層級,用Western blot之類的。這種事情每個人做法不盡相同,但大致上流程差不了太多。

等那些帶著新特徵的小動物被挑出來以後,大部分的人會讓牠們和普通品系交配幾輪,好像這樣比較容易確保下幾代也能維持那個特徵。不過也不是每次都很順利,有時候要重來好幾回才算穩定下來。

最後大家其實最在意的是那些小傢伙到底長得怎樣、是不是顯現預期中的變化。分析方式五花八門,有的人就單純觀察外觀,有時候則需要做些額外功能性的測試。結果嘛,其實常常沒有預期中明顯,也有碰過只改變了一點點,看起來跟沒動過差不多。不過,只要能抓到蛛絲馬跡,也算某種程度上的進展吧?

發光魚與蜘蛛絲山羊這些奇特生物能做什麼?

說到轉基因動物,這些年有些領域慢慢變得離不開牠們。像生醫實驗裡面,老鼠經常會被拿來當人類疾病的模擬例子吧,癌症、失智、心臟毛病……種類還真不少。有時候研究人員想找出病理機制,也許還能順便試看看一些治療方式。不過成效怎樣,每次看報告好像都說法不太一樣。

農業那邊呢,好像也早就開始試著讓牛產奶多一點,或是某些豬據說比較不容易生病。雞蛋嘛,有人努力讓雞下的蛋裡頭營養素比以前更多。不過好像各國規範差滿多,到底普及多少,大概只有產業裡的人比較清楚。

要講藥品生產,那種用動物「幫忙」製造藥物的方式也不是什麼新鮮事。有聽過羊被改造後,牠們的乳汁裡可以帶有一種叫抗凝血酶的蛋白質。這個東西後來被用在治療血液凝固問題上,但量到底有多少,大致上只是聽說比傳統辦法高出不少倍啦。

另外,有學者提到基因工程未來可能對瀕危動物保育派上點用場,像是想把基因多樣性補回去、甚至也許能延緩族群消失。不過這部分目前感覺還在討論階段,比較少看到真的大規模應用,好壞參半吧。

總之,各行各業對於轉基因動物的期待和疑慮都有一些聲音,很難三言兩語講完。

說到工業上那些跟基因有關的動物,最近有不少人開始討論像蜘蛛絲那類材料,其實有些科學家嘗試讓動物來生產這種東西,不過到底成效怎麼樣,好像還沒有完全定論。偶爾還會看到有人把這些生物當作偵測環境的小幫手,就是那種會發出螢光、碰到什麼污染就變色的魚之類的。

至於具體例子…腦海裡浮現幾個名字,有一隻老鼠,好像叫OncoMouse吧,那是專門拿來做癌症研究的,人們說它大概是第一批被申請專利的轉基因動物之一。不過,大家記得的可能更多是那種螢光魚,叫GloFish?市面上賣寵物店也看得到,但其實早期聽說本來想用來監測水質。有些豬,好像叫Enviropig,被改造過以後糞便裡面的磷少了許多,所以據說對環境比較友善,但好壞兩面都有討論。

然後大概十多年以前,有一批山羊被弄得可以在奶裡生產一種人類蛋白,應該算醫藥用途上的突破吧,不過規模多大一直不太確定。雞也有不同版本,一些能夠抵抗禽流感,理論上如果真的有效,也許某天養殖場裡疾病傳播會緩和一些。但話又說回來,這些方案是不是都已經全面普及,其實還很難講,也不是每個國家都會採用。

總之這領域常常冒出新點子,但哪些真的持續下去、哪些最後不了了之,大部分人也只能邊觀察邊修正期待。

參考來源

第十三章亂點鴛鴦譜(基因工程原理)

神奇的「剪刀、黏貼」技術,讓科學家們成了萬能造物者,所有物種不再「謹遵」遺傳定律,不論是植物、動物、微生物的DNA,皆可相互轉殖DNA到對方體內,例如,把蠍子的基因放入番 ...

來源: 國立清華大學

Columnist

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